Metode de laborator pentru diagnosticarea sifilis

reacția de polimerizare în lanț

Toate metodele de cercetare serologice care sunt utilizate în prezent, în mod convențional împărțite în două tipuri: non-treponemal. Calificari (NTT) - și treponemala. care confirmă prezența agentului patogen fluxurilor (TT) .Sifilis este foarte dificil, clinica este foarte neclară și nu întotdeauna evidente, astfel încât decizia de a utiliza diagnosticul corect, mai multe teste serologice. Când o confirmare a graf luate în prezența materialului Treponema pallidum (la microscop) diagnosticat imediat, iar restul testelor sunt rare.

Studii Netreponemnye (teste) - NTT - așa-numitele studii de screening, acestea nu sunt foarte scumpe și destul de un număr mare de pacienți pot fi inspectate prin intermediul lor, la aceleași rezultate în multe teste gata foarte repede. Dar, desigur, fals al bolii, efectuarea unor astfel de teste nepractic rezultat 100% nu va fi capabil să primească la o sensibilitate scăzută.

La efectuarea unui material de test non-treponemal examinate, au anticorpi care reacționează cu cardiolipina - antigen lecitină. Unul dintre primele teste a fost o metodă bazată pe o reacție imunologică Bordet - Zhang, care a acționat ca un antigen al extractului de ficat al nou-născutului, care a murit de sifilis. În prezent, în timpul acestor teste antigen acționează lecitină, colesterol și cardiolipin.

În străinătate, în special în Statele Unite ale Americii utilizează 4 metode nontreponemal, care sunt împărțite în două tipuri: metode care permit determinarea vizuală a rezultatelor reacției (RPR și TRUST) și metode pentru rezultate citire microscopice (USR și VDRL).

Prin netreponemnye metodele de diagnostic includ imunoenzimatică indirectă folosind ca cardiolipin antigen. În țara noastră și în țările CSI ca o testele non-treponemice sunt reacția plasmei cu ser inactivat (MP) și reacția în care legarea unui compliment la cardiolipină (RSK).

Toate metodele de diagnostic netreponemnye sunt foarte asemănătoare între ele. Acestea toate low-cost, pur și simplu și rapid apăsat. Aceste tipuri de teste nu sunt adecvate pentru detectarea bolii în faza inițială și în sifilis, care are loc pe ascuns (formă latentă de sifilis). Anticorpii, care sunt determinate prin teste non-treponemice apar undeva într-o lună după infectare treponemoy. În cele mai multe cazuri, pacienții care au fost tratați cu stadiul primar de sifilis, aproximativ un an teste non-treponemice sunt negative.

de cercetare treponemal (teste) - TT sunt mult mai scumpe tehnica dintre ele sunt foarte complexe și sunt utilizate pentru confirmarea rezultatelor pozitive care au fost obținute prin cercetare non-treponemal.

Așa cum am spus mai sus metodele treponemice sunt folosite pentru a confirma prezența Treponema pallidum în organism, care a fost identificat cu ajutorul testelor non-treponemice. La fel cum acestea sunt efectuate, în cazul în care a efectuat teste și nu ne-am dat un rezultat pozitiv, dar clinica presupune existența bolii. După vindecarea completă de sifilis, în mai mult de 80% vindecat, un răspuns pozitiv în timpul treponemala testează câțiva ani, iar unele - pentru viață. Pe baza acestei treponemala teste nu sunt utilizate pentru inspecții de rutină ale persoanelor care au finalizat cursul complet de tratament.

Cercetarea științifică în domeniul imunologiei si biologie moleculara continua pentru a menține și folosind cele mai noi tehnologii sunt noi teste pentru diagnosticul de sifilis, care are o poziție de lider. Un astfel de test, care este ferm stabilit în practică - legat testul immunosorbent (ELISA). și multe metode de cercetare sunt în curs de elaborare.

Complexul de teste serologice. care se desfășoară în România include o cuprinzătoare care efectuează teste serologice:

teste serologice standard -

completează reacția de legare (reacția Wassermann)

reacționat cu antigen treponemala și reacționează cu cardiolipină;

Reacțiile treponemale este pentru un grup

imunofluorescenta reacție (IFA)

atașament răspuns imun (RIP);

Reacțiile de proteine ​​treponemale specii specifice -

treponemes reacție imobilizare (RHS),

ALS - abs și variantele sale (IgM-FTA-ABS, 19S-IgM-FTA-ABS),

reacție treponemes gemaglyutsinatsii pasive (PHA).

În cazul în care testele serologice utilizate în combinație, aceasta va permite identificarea bolii într-un stadiu incipient al bolii.

Wasserman - este o metodă de legare a complementului. Pentru reacția, folosit ca extractele de antigen care sunt produse din treponemes pale (antigeni specifici) și cardiolipină - acest extract preparat din mușchi cardiac bovin (antigeni non-specifici). Cu cât există în materialul treponemes pal, cu atât mai mare gradul de boală și de a evalua gradul de avantaje:

1) - negativ; 2) + îndoielnic; 3) ++ slab pozitiv; 4) +++ pozitiv; 5) ++++ rezkopolozhitelnaya.

Wasserman (complement reacție de fixare a) în mod obligatoriu petrece împreună cu reacțiile sedimentar - Sachs - Vitebsk și Caen. Natura imunologică a reacțiilor obschem- aceeași ca și cea a reacției Wassermann, dar aceste reacții necesită antigene mai bogate, care, atunci când intră în reacție cu reagin ser da mai precipitat. Seronegative set de sifilis primar, în cazul în care testele serologice standard, a dat un rezultat negativ. Identificarea sifilisul reacția Wassermann eficient la sifilis secundar seropozitive, aici rezultatele testelor efectuate pe un corect 100%. La etapa terțiară a rezultatelor sifilis sunt corecte activ in mai mult de jumatate din pacienti, iar in stadiile avansate de sifilis, cu înfrîngerea organelor și sistemelor interne, rezultatele sunt corecte jumătate dintre pacienți. La pacienții cu sifilis congenital precoce teste serologice da un rezultat pozitiv este aproape întotdeauna cazul. și la pacienții cu sifilis congenital tardiv - aproape 80% din cazuri.

Principiul RSK este că reagin găsit în serul pacienților cu sifilis, au capacitatea de a intra în legătură cu o varietate de antigeni. Complexele rezultate sunt triate reacționează complement. Sistemul hemolitică este utilizat pentru a afișa reagin complex antigen-complement (un amestec de celule roșii din sânge de oaie cu ser hemolitic). În prezența celulelor roșii ale complexului pentru a precipita. Asta nu vooruzhenynm semnificativ ochi. Severitatea cheilor medic hemoliză desemnat: un puternic pozitiv 4+, 3+ pozitiv, slab pozitiv 1+ 2+ dacă și negativ. De asemenea, estimarea calitativă a acestor reacții are și cuantificarea relevanță în diagnosticul unor etape de sifilis și în monitorizarea eficacității tratamentului

imunofluorescenta reacție (IFA) se bazează pe detectarea anticorpilor, care sunt etichetate cu soluție fluorescentă specifică la o lumină violet o lampă de cuarț este conectat pentru a detecta anticorpul antigen. Această reacție are o sensibilitate ridicată și ajută la identificarea bolii în stadiul primar al seronegativ sifilis. Doar tocmai acest test ajuta la detectarea bolii la pacienții la care boala este latente sau stadii tardive. Există mai multe tipuri de astfel de reacții și cele mai apreciate RIF-200, cu ajutorul căruia se pot identifica sifilis latent si identifica rezultatele DAC non-specifice. Dar, în ciuda nivelurilor ridicate de RIF-200, diagnostic formal are loc după toate testele clinice. RIF nu este potrivit pentru monitorizarea pacienților după tratament complet. deoarece negativiruetsya destul de lent în etapa de tratament.

Reacție immunogo adeziune (RIP). Baza acestei reacții constă treponemes de adeziune, care sensibilizează ser, eritrocite și pierderea lor în precipitat. Rezultatele sunt evaluate în conformitate cu tabelul de mai jos:

Prin toate indicațiile RIP este foarte similar cu RIT și RIF. Această reacție este efectuată în câteva cazuri, dacă pe baza simptomelor clinice, istoricul medical, teste de laborator sifilis nu este confirmată, pentru a controla boala, după ce a primit tratamentul necesar și pentru a confirma rezultatele BDCE.

Reacție imobilizare pal treponemes (RHS) .Popav într-un mediu în care există ser de test immobiliziny și complement activ, palid treponema își pierd mobilitatea. Pe baza acestei și această reacție. RIT este foarte specific și este utilizat pentru recunoașterea sifilis latent, pentru diagnosticul de sarcină. care este suspectat de sifilis și multe alte cazuri în care testele serologice standard de puțin specifice. Marele dezavantaj al acestei reacții este că este foarte scump, iar activitatea sa - un proces foarte complex. Rezultatele sunt citite pe un interes de imobilizare a datelor pal treponemes:

-Negativ - 20%; -somnitelnaya -21-30%; -slabopolozhitelnaya -31-50%; un rezultat pozitiv -51-100%.

Datorită faptului că immobiliziny apar în sânge după ce alt răspuns al anticorpilor devine pozitiv mai târziu decât în ​​alte reacții. În faza primară a infecției, de regulă, există o reacție negativă sau slab pozitiv. In stadiul secundar de sifilis, deși aspectul seric immobilizinov al pacientului este de până la 60%, reacția este pozitivă în aproape jumătate din test. La sifilis secundar de recidivă etapă RHS pozitive aproape 90% dintre pacienți. La etapa terțiară a dezvoltării sifilis, cu înfrângerea organelor interne, inclusiv sistemul nervos, când Wasserman dă rezultate negative, reacția imobilizare pal treponem pozitiv aproape 100% dintre pacienți. Într-un stadiu incipient al reacției sifilis congenital este pozitiv la aproape toți pacienții, dar în etapa ulterioară de sifilis congenital - aproape 100% dintre pacienți. sifilis latent seropozitiv este confirmată numai după RHS, care se efectuează după obținerea de rezultate pozitive în timpul altor teste serologice. RIT nu este folosit pentru a controla boala la pacienti. care au primit tratamentul necesar.

absorbție imunofluorescență cu Treponema pallidum (FTA-ABS) .Dacă reacția este efectuată pentru un pacient care este bolnav de sifilis și nu sunt tratate, atunci reacția dă un rezultat pozitiv întotdeauna. De asemenea, este probabil sa dezvaluie o infectie cu ajutorul FTA-ABS de la începutul bolii. Reacția are o sensibilitate și specificitate mare. Pentru diagnosticul de sifilis latent, iar în aceste cazuri, atunci când a fost efectuat câteva teste și au arătat un rezultat negativ, dar clinica spune infectie Treponema pallidum, în astfel de cazuri, diagnosticul se bazează adesea pe rezultatele FTA-ABS. La o săptămână după Treponema palid a lovit organismul incepe sa produca anticorpi IgM specifici, care vor înceta în cele din urmă să apară după 2 ani nu a fost stabilită. Pentru a înțelege dacă tratamentul propus pune în aplicare, efectuarea unor teste speciale pentru a determina specificitatea acestor anticorpi. Astfel de teste de astăzi sunt mai multe, dar care le deține prea scump, așa că pentru majoritatea pacienților, aceste teste nu sunt efectuate.

reacția de hemaglutinare. care definește anticorpi specifici pentru Treponema pallidum (micro-PHA). Pentru această reacție, ca antigen sunt Treponema, astfel încât această reacție este foarte specifică și să dea rezultate adevărate în cele mai multe cazuri.

immunosorbent assay (ELISA), una dintre cele mai specifice pentru diagnosticul de sifilis. În prezent, versiunea cea mai frecvent utilizată de ELISA indirect. Avantajele acestei metode de cercetare sunt clare: nu prea mult costul, ușurința de precizie suficient de mare a rezultatului, cu ajutorul acestei analize pot fi identificate într-un stadiu incipient sifilisul, cele mai rapide rezultate.

Metoda imunoblotare se bazează pe un imunoenzimatice, care este combinat cu electroforeză. Acesta este unul dintre testele cele mai specifice și cu ajutorul lui există o confirmare a infecției cu sifilis.