Analiza PCR a transcript ca ia la bărbați și femei

Metoda foarte informativ PCR (reacție în lanț a polimerazei) permite detectarea precoce a diferitelor boli genetice și infecțioase care apar acută sau cronică. Și ele pot fi identificate chiar și într-un stadiu în care nu apar nici un simptom în sine. Cel mai adesea recurg la analiza PCR pentru detectarea bolilor cu transmitere sexuală (BTS, ITS).

Ce este analiza PCR

Analiza PCR se referă la metode moleculare de diagnostic care se bazează pe o creștere multiplă a concentrațiilor scăzute de fragmente specifice de acid nucleic (ADN) ale agentului patogen în orice material biologic (frotiuri de sange ale colului uterin, vaginului, uretră, sânge, salivă, spută și altele asemenea. D.) și compararea ADN-ul sau ARN-ul, cu o bază de date de tipuri de date cunoscute de infecții.

Avantajele diagnostice PCR peste alte metode

Tehnica PCR a fost utilizat pe scară largă în medicina modernă, datorită unui număr de avantaje incontestabile. Vă vom spune despre ele mai în detaliu.

Capacitatea de a detecta în mod direct prezența agentului patogen

Multe dintre tehnicile tradiționale de diagnosticare se bazează pe determinarea markerilor - proteine ​​care sunt produsele activității vitale a agentului patogen. O astfel de principiu de diagnostic nu poate da decât o dovadă indirectă a patologiei. Metoda PCR asigură o determinare directă a agentului patogen, deoarece identifică anumite regiuni ale ADN-ului organismelor patogene.

mare specificitate

Metodologia PCR diferă deoarece specificitate ridicată, care permite detectarea fragmentelor de ADN, care sunt specifice pentru un anumit agent infecțios. Atunci când se utilizează metode imunologice este probabilitatea de a obține un rezultat fals (eroare în diagnosticul legat de antigeni cu reactivitate încrucișată). În ceea ce privește PCR, erorile sunt eliminate, deoarece specificitatea în acest caz, este dată de secvența de nucleotide a primerilor.

sensibilitate ridicată

Prin această metodă, chiar și agenții patogeni individuali sunt determinate. sunt detectate în corpul Patogeni uman chiar și atunci când alte metode de diagnostic nu clarifica situatia (este vorba despre o varietate de metode microscopice și bacteriologice imunologice de cercetare).

Aici sunt datele pentru comparație. Sensibilitate metode microscopice și imunologici de 103-105 celule și sensibilitatea PCR - 10-100 celulele din probă.

Metode generice

Tehnica PCR se bazeaza pe studiul ADN-ului organismelor patogene. Studiul a determinat fragmentele de ADN sau ARN, care sunt specifice pentru anumite agenți patogeni. Deoarece toți acizii nucleici au o compoziție chimică similară, prin metode de analiză de laborator pot fi aplicate uniform. Acest lucru înseamnă că investigarea eșantionului face posibilă detectarea mai multor agenți patogeni.

rezultate rapide

Această tehnică nu necesită cultivarea culturilor de agenți patogeni, care iau o mulțime de timp. Prin utilizarea tehnologiei standardizate de prelucrare a materialului și detectarea produșilor de reacție, precum și un proces automat toate studiul procedurii de amplificare durează câteva ore.

Abilitatea de a detecta infecția într-o formă latentă

Tehnica PCR face posibilă efectuarea în mod eficient diagnosticarea preclinice (detectarea patogenilor înainte de debutul simptomelor) si diagnostic retrospectiv (identificarea agenților patogeni după efectuarea bolii). Astfel, diagnosticul preclinice este de mare importanță atunci când examinarea pacientului în perioada de incubație a bolii este posibil - după infecția ar trebui la debutul primelor simptome.

Un avantaj important este capacitatea de a folosi PCR pentru a analiza reziduurilor biologice sau materiale de arhivă. Acest lucru face posibilă identificarea paternității și identitatea.

Metoda PCR

Baza acestei metode diagnostic se repetă dublarea porțiunii de ARN sau ADN. Acest proces este implementat în laborator, folosind enzime specifice. Ca rezultat, format ca regiuni ale ADN-ului (ARN) după cum este necesar pentru examinarea vizuală. In timpul procedurii numai porțiunea copiată corespunzătoare pentru a preciza condițiile (dacă este prezentă în proba investigată).

În următoarea etapă a rezultatelor de diagnostic sunt analizate și comparate cu o bază de date de infecții.

Tehnica PCR nu este doar vă permite să se determine tipul de agent patogen, dar, de asemenea, vă permite să tragă concluzii cu privire la numărul de agenți patogeni în corpul uman.
Astăzi, utilizarea unor astfel de tehnologii oferă posibilități excelente pentru studiu mutații, regiuni de ADN despicare. În medicina modernă, metoda a început să fie utilizată pentru a determina de paternitate, pentru a identifica noi gene si mai mult.

Datorită flexibilității sale metodei PCR este utilizat pe scară largă în urologie, ginecologie, pneumologie, oncologie, hematologie, tuberculoza, o practica boli infectioase si alte domenii ale medicinei.

Materialul pentru analiza PCR

PCR de diagnostic aplica diverse mediu lichid biologic prelevat din corpul uman: sputa, mucus, salivă, urină, sânge, răzuire celule epiteliale, de țesut placentar, fluid pleural, fluid amniotic, suc de prostată și altele.

In diagnosticul bolilor cu transmitere sexuală (BTS) sunt supuse analizei externarea din organele de reproducere masculine și feminine. Pentru a face acest lucru, efectuați un frotiu sau racla din uretra sau colului uterin. Este, de asemenea, utilizat pentru studiul de urină.

Pentru a identifica infecțiile (herpes, mononucleoza, citomegalovirusul, toxoplasmoza, HIV, hepatita B și C) în analiza sângelui este luată. Pentru leziunile suspecte ale sistemului nervos produc gard de lichid cefalorahidian.

Pentru cercetarea pulmonară folosind lichidul pleural si flegma.

Pentru a detecta infecții intrauterine țesutului placentar supuse analizei, și lichidul amniotic.

PCR pentru ITS și alte infecții

Ce infecție poate fi detectată prin analiza PCR

- infecției cu HIV (poate fi identificat virusul imunodeficienței HIV-1).

- Hepatita virală A, B, C, G (ARN-HAV, ADN-VHB, ARN-VHC, ARN-HGV).

- (Infecții cu transmitere sexuală) cu ITS - ureaplasmosis, vaginita bacteriana, Chlamydia, micoplasmoze, trichomoniaza.

- mononucleoza infecțioasă (Epstein-Barr DNA -VEB).

- infecții cu citomegalovirus (ADN-CMV).

- infecția herpetică (herpes simplex virus ADN de HSV tip 1 și 2).

- Tuberculoza (Mycobacterium tuberculosis).

- virusuri oncogene - infecție cu virus (virusul papiloma uman (inclusiv sale tipuri oncogene 16, 18, 31, 33, 45, 51, 52, 56, 58 și 59).

- boala Lyme, encefalită de căpușă.

- Candidoza (fungi din genul Candida).

- infecția cu Helicobacter pylori (Helicobacter pylori)
și altele.

Pregătirea și depunerea de PCR

Pacienții care au trecut materiale pentru PCR de diagnostic, se bazează pe obținerea de rezultate rapide și precise. Astfel, este necesar să se ia în considerare un punct important - acuratețea diagnosticului nu depinde numai de profesionalismul și capacitățile laboratorului medical. Pentru studiu a fost informativ, acesta trebuie să facă un efort și pacientul însuși. Deci, trebuie să respecte cu strictețe toate recomandările medicului și urmați cu atenție regulile de pregătire pentru colectarea de material. Este important să se evite contaminarea probelor biologice, în caz contrar rezultatele sondajului vor fi denaturate.

Pregătirea pentru analiza PCR

Pregătirea pentru procedura nu este legată de provocări speciale. Este suficient să ne amintim câteva reguli:

- Analiza PCR din sânge trebuie să postesc. Sângele este extras dintr-o venă, de obicei, în ac steril dimineață într-un recipient special.

- In timpul zilelor inainte de material aportul prezentat abstinența în timpul capturării PCR frotiu ITS.

- Urina PCR ia prima porțiune, containerul trebuie să fie sterile.

Cum să luați analiza PCR la bărbați și femei

Analiza PCR este luat de la bărbați și femei în camera de vaccinare, era de sânge dintr-o venă, tampoane de saliva de la gât, amigdale, tampoane nazale de la etc. Metoda de eșantionare nu este diferită.

PCR ITS stau în clinica prenatală la un examen ginecologic la femei este tampoanele vaginale ale colului uterin, uretra. La bărbați în timpul unei vizite androlog sau venereologist este un frotiu din uretra.

Schema de material gard pentru PCR

materialul gard Schema de nas PCR

Material gard Schema cu amigdalele PCR

Material gard Scheme cu conjunctivă PCR

Schema de material gard pentru PCR cu mucoasa bucală

Schema de material de gard pentru a PCR la femei

Schema de material de gard pentru a PCR la bărbați

Cât timp PCR

Pacienții nu trebuie să aștepte mult timp pentru rezultatele sondajului PCR. Pe întreaga procedura de analiză de obicei durează de la câteva ore (în timp real PCR) până la 2-10 zile. De regulă, rezultatele în mâinile sale pacientul primește 2-5 zile la un maxim de 10 de zile, aceasta depinde de tipul de analiză. diagnosticare PCR este cel mai lung sange pentru HIV si hepatita, precum și cel al tuturor tampoane și pilitură - 2-3 zile.

Analiza PCR Transcriere

Un rezultat negativ indică faptul că în acest moment în materialul biologic nu poate fi detectat urme de agenți patogeni. Adică infecție, despre care a fost efectuat sondajul, nr.

Un rezultat pozitiv indică detectarea urmelor de patogen într-o probă biologică. Acest lucru înseamnă că, în acest moment infecția este prezentă în corpul uman.
Pot exista ocazii când PCR conduce la un rezultat pozitiv, dar a fost observată infecție activă. Este vorba despre un fenomen care este numit „purtător sănătos“. astfel încât pacientul nu are nevoie de tratament, dar acestea ar trebui să fie sub observație dinamică constantă. Astfel de situații sunt caracteristice infecțiilor virale: virusul Epstein-Barr (EBV), herpes ginitalny, citomegalovirusul (CMV), virusul papiloma uman (HPV), în care să studieze probele sunt prelevate din camerele locale (raclare a uretrei, colului uterin, saliva). În același timp, nu trebuie să uităm că purtătorii sănătoși pot transmite infectia altor persoane. De asemenea, nu exclud activarea procesului de infecție. În cazurile în care PCR dă un rezultat pozitiv la un test de sânge, acesta nu poate fi considerat transport. Astfel de pacienți au nevoie de un tratament specific al bolii cauzate de agentul patogen detectat.

Indicatorii cantitativi nu sunt gradații comune. Medicul lor evaluează în mod individual pentru fiecare infecție specifică. Rezultatele cantitative permite determinarea infecției cât de activ și de a identifica etapa de proces.

Fiabilitatea metodei PCR

Pentru a evalua eficacitatea metodelor, există trei criterii:

- Exactitatea - detectarea infecției (sau lipsa acestora) cu un grad ridicat de probabilitate.

- Specificitatea - precizia determinării unui patogen specific.

- Sensibilitate - capacitatea de a identifica agentul patogen chiar și atunci când o mică cantitate de material genetic într-o probă biologică.

Când se folosește metoda PCR pentru a obține rezultate fals pozitive este practic imposibil (adică, în cazul în care agentul patogen este absent, atunci eșantionul pozitiv nu va).

rezultate fals negative este posibil, dar acest lucru se întâmplă foarte rar. Astfel de situații apar în cazul în care infecția la momentul studiului este inactiv. De exemplu, infecția cronică este infecție activă sau latentă.